伏馬菌素污染及快速定量檢測(cè)方案--8min準(zhǔn)確定量
伏馬菌素 (Fumonisin FB) 是一種霉菌毒素,是由串珠鐮刀菌 (Fusarium moniliforme Sheld)產(chǎn)生的水溶性代謝產(chǎn)物,是一類(lèi)由不同的多氫醇和丙三羧酸組成的結(jié)構(gòu)類(lèi)似的雙酯化合物。
主要污染糧食及其制品,并對(duì)某些家畜產(chǎn)生急性毒性及潛在的致癌性,已成為繼黃曲霉毒素之后的又一研究熱點(diǎn)。
一、來(lái)源
在自然界中產(chǎn)生伏馬菌素的真菌主要是串珠鐮刀菌,其次是多育鐮刀菌(Fusariumproliferatum)。這兩種真菌廣泛存在于各種糧食及其制品中,因此它們產(chǎn)生的伏馬菌素容易污染糧食類(lèi)農(nóng)產(chǎn)品,尤其是玉米。研究發(fā)現(xiàn),即使在干燥溫暖的環(huán)境中,串珠鐮刀菌是玉米中出現(xiàn)最頻繁的菌種之一。
二、種類(lèi)
到目前為止,發(fā)現(xiàn)的伏馬菌素有FA1、FA2、FB1、FB2、FB3、FB4、FC1、FC2、FC3、FC4和FP1共11種,其中FB1是其主要組分。FB1對(duì)食品污染的情況在世界范圍內(nèi)普遍存在,主要污染玉米及玉米制品。FB1為水溶性霉菌毒素,對(duì)熱穩(wěn)定,不易被蒸煮破壞,所以同AFT(黃曲霉毒素)一樣,控制農(nóng)作物在生長(zhǎng)、收獲和儲(chǔ)存過(guò)程中的霉菌污染仍然是至關(guān)重要。
有報(bào)道指出,伏馬菌素對(duì)人、畜不僅是一種促癌物,而且完全是一種致癌物。動(dòng)物試驗(yàn)和流行病學(xué)資料已表明,伏馬菌素主要損害肝腎功能,能引起馬腦白質(zhì)軟化癥和豬肺水腫等,并與我國(guó)和南非部分地區(qū)高發(fā)的食道癌有關(guān),現(xiàn)已引起世界范圍的廣泛注意。
三、污染狀況
對(duì)于伏馬菌素對(duì)糧食的污染狀況,國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究最多的是玉米。Kpodo等在對(duì)來(lái)自加納首都阿克拉四個(gè)市場(chǎng)和加工場(chǎng)所的玉米樣品進(jìn)行FB1、FB2和FB3污染的分析中發(fā)現(xiàn),所有的樣品均含有伏馬菌素,其中1份明顯霉變的玉米中總伏馬菌素的含量高達(dá)52.670mg/kg,其余14份樣品總伏馬菌素污染水平為0.070~4.222mg/kg。
伏馬菌素對(duì)玉米的污染率和污染水平受?chē)?guó)家和地區(qū)、玉米品種、季節(jié)的影響。1995年~1996年,Amra等對(duì)從埃及不同省份收集的120份樣品進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果顯示,冬季收集的白玉米和黃玉米FB1污染率均為最高。伏馬菌素還可以污染其他糧食及其制品,且不同地區(qū)污染狀況也存在差異。
1996年我國(guó)對(duì)玉米、小麥等糧食作物中FB1污染進(jìn)行調(diào)查.發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)均有不同程度污染。我國(guó)食道癌高發(fā)區(qū)林縣的玉米伏馬菌素污染率為48%。因此,人們懷疑該地區(qū)食道癌高發(fā)與食用污染此毒素玉米相關(guān)。
3.1.伏馬菌素的起因和特性
伏馬菌素主要是由串珠鐮刀菌菌f.moniliforme和f.proliferatum在一定溫度和濕度條件下繁殖所產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物。直到1988年,南非和美國(guó)的研究人員才首次從霉變的玉米中分離出伏馬毒素(fumonisins)b1。糧食在加工、貯存、運(yùn)輸過(guò)程中易受上述兩種真菌污染,特別是當(dāng)溫度適宜時(shí),更利于其生長(zhǎng)繁殖,從而產(chǎn)生出一類(lèi)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相似的毒素,其中含有伏馬毒素b1、b2和b3,60%以上為伏馬毒素b1,其毒性也最強(qiáng)。因此,伏馬毒素可以通過(guò)糧食加工、飼料生產(chǎn)等過(guò)程對(duì)畜牧業(yè)乃至人類(lèi)健康產(chǎn)生較嚴(yán)重的危害。
伏馬菌素純品為白色針狀結(jié)晶,為一類(lèi)相關(guān)的極性、水溶性代謝產(chǎn)物,為多氫醇和丙三羧酸的雙酯化合物,對(duì)熱很穩(wěn)定,不易被蒸煮破壞,在多數(shù)糧食加工處理過(guò)程均比較穩(wěn)定。
3.2.伏馬毒素的發(fā)生情況
伏馬菌素尤其是fb1對(duì)飼料污染的情況在世界范圍內(nèi)普遍存在,且對(duì)糧食作物的污染情況較嚴(yán)重,其污染的飼料主要為以玉米為原料的飼料。玉米中伏馬毒素含量受許多環(huán)境因素的影響,如收獲前和收獲期間的溫度、濕度、干旱情況和玉米中高水平的伏馬毒素與前期干熱后期一段高濕天氣有關(guān)。玉米中伏馬毒素含量也受貯存條件的影響,如收獲的玉米在貯存期間水分在18%~23%時(shí),最適宜產(chǎn)伏馬毒素的串珠鐮刀菌的生產(chǎn)和繁殖,導(dǎo)致玉米中伏馬毒素含量的增加。
飼料中伏馬菌素的檢測(cè)伏馬毒素的檢測(cè)先后使用過(guò)薄層色譜法、氣相色譜法、酶聯(lián)免疫法(elisa)、高效液相色譜法(hplc)等,目前研究和應(yīng)用得最多的是利用免疫親和柱凈化后的熒光儀檢測(cè)法和hplc法。
四、預(yù)防與控制
伏馬菌素主要污染玉米及其制品,偶爾在高梁、大豆和豌豆中檢出。對(duì)伏馬菌素中毒的預(yù)防主要應(yīng)注意以下幾個(gè)方面:
?、偌訌?qiáng)糧食的通風(fēng)、防潮、防霉管理,及時(shí)對(duì)田間和貯藏的玉米、麥類(lèi)、稻谷等糧食和飼料原料進(jìn)行干燥處理,防止串珠鐮刀菌等產(chǎn)毒真菌的污染、繁殖和產(chǎn)毒。
②不用發(fā)霉的玉米加工食品。
③不食用發(fā)霉變質(zhì)的玉米及玉米制品,減少攝入伏馬菌素的可能性。
五、南京微測(cè)生物伏馬菌素快速定量檢測(cè)方案--8min準(zhǔn)確定量
南京微測(cè)生物基于熒光定量FPOCT技術(shù)平臺(tái),可在8min快速準(zhǔn)確定量的檢測(cè)出玉米中伏馬毒素的殘留含量,準(zhǔn)確性符合HPLC法的檢測(cè)結(jié)果,適用于各類(lèi)玉米、飼料加工企業(yè)、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)及政府監(jiān)管部門(mén)。
5.1.伏馬菌素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)系統(tǒng)性能
5.2樣品前處理過(guò)程
1、 粉碎(樣品粉碎處理);
2、 振蕩提取(5min);
3、 離心(2min);
5.3.檢測(cè)操作過(guò)程
1、 稀釋;
2、 加樣反應(yīng)(8min);
3、 讀數(shù),打印檢測(cè)報(bào)告;
5.4.結(jié)果判讀和輸出
采用便攜式真菌毒素檢測(cè)儀進(jìn)行讀數(shù),使得檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確、客觀,避免人為的誤判。
檢測(cè)結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上,同時(shí)可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測(cè)報(bào)告,另外,開(kāi)通儀器的WIFI數(shù)據(jù)上傳功能后,檢測(cè)相關(guān)數(shù)據(jù)信息將自動(dòng)上傳至“食品安全溯源管理云平臺(tái)”,便于溯源及質(zhì)量管理。
5.5. 南京微測(cè)生物真菌毒素系列熒光定量檢測(cè)試紙條產(chǎn)品亮點(diǎn)
?8min快速定量:集膠體金快速檢測(cè)、酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)、色譜質(zhì)譜準(zhǔn)確檢測(cè)的特點(diǎn)于一身,實(shí)現(xiàn)8min內(nèi)真菌毒素的快速準(zhǔn)確定量檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果可現(xiàn)場(chǎng)打印;
?內(nèi)置定量標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),無(wú)需檢測(cè)時(shí)再做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),既節(jié)省了成本,也避免了操作人員與真菌毒素的接觸,保護(hù)操作人員的安全;
?隨到隨檢:對(duì)檢測(cè)樣本量無(wú)要求,既可單個(gè)或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時(shí)檢測(cè),并可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè);
?過(guò)程簡(jiǎn)便:樣品前處理簡(jiǎn)便,操作簡(jiǎn)單,也無(wú)需對(duì)檢測(cè)樣本提取液進(jìn)行任何pH的調(diào)節(jié);
?配置要求低:對(duì)配套的儀器設(shè)備及人員要求低,最低儀器配置僅需1臺(tái)天平、1把100ul和1ml移液器即可,操作人員僅需短期培訓(xùn)就能熟練掌握;
?遠(yuǎn)程網(wǎng)絡(luò)支持:儀器可通過(guò)網(wǎng)絡(luò)自動(dòng)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)讀取、軟件升級(jí)、問(wèn)題故障診斷、質(zhì)量控制等;
?性?xún)r(jià)比高:花膠體金試紙條的價(jià)格,獲得色譜質(zhì)譜檢測(cè)的質(zhì)量和結(jié)果,并且節(jié)省人力物力,大幅降低檢測(cè)費(fèi)用;